干熱滅菌生物指示劑采用特定菌種：干熱滅菌生物指示劑通常選用枯草桿菌黑色變種芽孢（Bacillus atrophaeus ATCC 9372），該菌種具有較強(qiáng)的耐熱性，能夠在干熱條件下存活一定時(shí)間，對干熱滅菌過程有較好的指示作用。

芽孢的存活與滅活：在干熱滅菌過程中，如果滅菌處理不完全，芽孢能夠在高溫環(huán)境下存活下來。而當(dāng)滅菌條件達(dá)到要求，足以殺死所有微生物時(shí)，芽孢則會(huì)被全部滅活。

培養(yǎng)與顏色變化：滅菌完成后，將生物指示劑中的菌體芽孢放入含有 pH 指示藥的培養(yǎng)液中，在 30℃-37℃的溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。如果滅菌不徹底，殘存的芽孢會(huì)在培養(yǎng)液中遇到適宜的條件開始繁殖，并代謝產(chǎn)生酸性物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)液的 pH 值降低，從而使培養(yǎng)液顏色發(fā)生變化，如由紅色變成黃色 。反之，如果滅菌完全，芽孢全部死滅，培養(yǎng)液中無芽孢繁殖代謝，顏色則保持紅色不變。

對照管的設(shè)置：為了確保結(jié)果的準(zhǔn)確性，每次檢測時(shí)都會(huì)使用同一批號未滅菌的菌片放入培養(yǎng)基中作為對照管，與滅菌后的菌片同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。只有當(dāng)對照管的培養(yǎng)液顏色由紅色變成黃色呈陽性，而滅菌后的菌片培養(yǎng)液顏色保持紅色不變時(shí)，此次生物學(xué)檢測結(jié)果才算有效，才能判定滅菌是完quan的。