操作指南
BD采用******技術(shù),從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中分離出BD Matrigel 基底膜基質(zhì),其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,巢蛋白,硫酸肝素糖蛋白等組成,還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。BD Matrigel基底膜基質(zhì)在室溫條件下,聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),模擬體內(nèi)細胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化,以及對細胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵染和基因表達的研究。
BD Matrigel 基底膜基質(zhì)形成的三維培養(yǎng)基質(zhì),可促進上皮細胞、肝細胞、Sertoli細胞、黑色素瘤細胞、血管內(nèi)皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化。同時,Matrigel還能影響乳腺上皮細胞的蛋白表達,支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化。高濃度的Matrigel適用于研究體內(nèi)血管生成和腫瘤細胞遷移及腫瘤模型的建立等。
產(chǎn)品特性
Matrigel基質(zhì)會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無菌環(huán)境下進行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。
細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質(zhì)層表面生長,也可在1mm厚度的Matrigel三維基質(zhì)內(nèi)生長。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質(zhì)的蛋白層,可以用于細胞貼壁,但不能用于細胞的分化研究。
注意:可將凍融后的Matrigel分裝在多個小管,所有分裝均需用預(yù)冷的凍存管,迅速冷凍并保存,避免多次凍融。
Matrigel在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠,因此溶解時在4℃冰上過夜凍融(4度時會隨著溫度的上升部分成膠)。所有用品在使用前需置于冰浴,必須使用預(yù)冷的移液管、吸頭及小管操作Matrigel。成膠后的Matrigel可以在4℃24-48小時后重新呈液態(tài)。
推薦包被與成膠方法
注意:為了保證Matrigel基質(zhì)膜的成膠性能與穩(wěn)定性,稀釋濃度不應(yīng)低于1:3,可用無血清培養(yǎng)基稀釋,Matrigel成膠后立即使用。
薄膠成膠方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,加入濃度為50μL/cm2生長面積的Matrigel基質(zhì)。
3.在37℃放置30分鐘,即可使用。
厚膠成膠方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.將需要使用的培養(yǎng)板置于冰浴,將培養(yǎng)的細胞與Matrigel基質(zhì)混合,用移液槍頭使其懸浮于基質(zhì)中。加入濃度為150-200μL/cm2生長面積的Matrigel基質(zhì)。
3.在37℃放置30分鐘,可成膠?？梢约尤爰毎囵B(yǎng)的基質(zhì),也可使細胞直接生長在膠表面。
薄層包被方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.根據(jù)使用需要,采用無血清培養(yǎng)基稀釋Matrigel基質(zhì)。根據(jù)實驗需要確定*包被濃度。
3.將稀釋的Matrigel基質(zhì)包被于所需的培養(yǎng)器皿中,包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育1小時。

4.去除未結(jié)合的Matrigel,用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。

BioCoat細胞外基質(zhì)訂購：

貨號	名稱	規(guī)格	優(yōu)惠價
356234	BD Matrigel Basement Membrane Matirx 基質(zhì)膜	5ml	1450
354234	BD Matrigel Basement Membrane Matirx 基質(zhì)膜	10ml	2450
356237	BD Matrigel Matrix，Phenol Red-free 基質(zhì)膜	10ml	3034
356230	Growth Factor Reduced Matrigel Matrix 基質(zhì)膜	5ml	2325
354230	Growth Factor Reduced Matrigel Matrix 基質(zhì)膜	10ml	4533
356231	Growth Factor Reduced BDMatrigel Matrix  Phenol Red-free 基質(zhì)膜	10ml	4883
356235	BD Matrigel Basement Membrane matrix，BD Matrigel基底膜基質(zhì)	50 ml	尋價
354248	BD Matrigel Basement Membrane matrix，High Concentration (HC)	10 ml	尋價
354262	BD Matrigel Basement Membrane matrix，Phenol Red-free(無酚紅)	10 ml	尋價
354263	Basement Membrane Matrix，Growth Factor Reduced(GFR)(低生長因子)	10 ml	尋價
354277	hESC-qualified Matrix	5 ml	尋價
354008	BD 纖維粘連蛋白，人BD Fibronectin, human	1.0 mg	尋價
356008	BD 纖維粘連蛋白，人BD Fibronectin, human	5.0 mg	尋價

用BD細胞回收劑（354253）或離散酶（354235）可降解Matrigel基質(zhì)，冰浴7小時后回收得到細胞。 
BD BioCoat細胞外基質(zhì)
Material	Material description	Size	 
BD BioCoat BD Matrigel基底膜基質(zhì)
356234	MATRIGEL MATRIX 5ML DI	5ML	 
354234	MATRIGEL MATRIX 10ML DI	10 ML	 
356235	MATRIGEL MATRIX BULK (5X 354234)	5x10ML	 
354248	MATRIGEL MATRIX HIGH PROTEIN 10ML DI	10ML	 
356237	MATRIGEL MATRIX PHENOL RED FREE 10ML DI	10ML	 
354262	MATRIGEL MTRX HIGH PRO NO PHENOL RD 10ML	10ML	 
356230	MATRIGEL MATRIX GFR 5ML DI	5ML	 
354230	MATRIGEL MATRIX  GFR 10ML DI	10 ML	 
354263	MATRIGEL MATRIX HIGH PROTEIN GFR 10ML	10ML	 
356231	MATRIGEL MATRIX GFR NO PHENOL RD 10ML DI	10ML	 
BD BioCoat Dispase分散酶
354235	DISPASE 100ML DI	100ML	 
BD BioCoat BDTM 細胞回收液
354253	CELL RECOVERY SOLUTION 100ML RT	100ML	 
BD BioCoatⅠ型膠原
354243	COLLAGEN I HUMAN NATURAL 250UG DI	0.25MG	 
354265	COLLAGEN I HUMAN NATURAL 10 MG	10MG	 
354236	COLLAGEN I RAT TAIL NATURAL 100MG WI	100MG	 
356236	COLLAGEN I RAT TAIL BULK (10X 354236)	10x100MG	 
354249	COLLAGEN I RAT TAIL HI PROTEIN 100MG WI	100MG	 
BD BioCoatⅡ型膠原
354257	COLLAGEN II BOVINE 5MG DI	5MG	 
BD BioCoatⅢ型膠原
354244	COLLAGEN III HUMAN NATURAL 250UG DI	0.25MG	 
BD BioCoatⅣ型膠原
354245	COLLAGEN IV HUMAN NATURAL 250UG DI	0.25MG	 
354233	COLLAGEN IV MOUSE NATURAL 1MG DI	1MG	 
356233	COLLAGEN IV MOUSE BULK (10X 354233)	10x1MG	 
BD BioCoatⅤ型膠原
354246	COLLAGEN V HUMAN NATURAL 250UG DI	0.25MG	 
BD BioCoatⅥ型膠原
354261	Collagens Collagen VI, Human 	500 μg	 
BD BioCoat纖維粘連蛋白（FN）
354008	FIBRONECTIN HUMAN NATURAL 1MG WI	1 MG	 
356008	FIBRONECTIN HUMAN NATURAL 5MG WI	5MG	 
356009	FIBRONECTIN HU BULK (5X 356008)	5x5MG	 
BD BioCoat層粘連蛋白(LM)
354232	LAMININ MOUSE NATURAL 1MG DI	1MG	 
354259	LAMININ ENTACTIN HI CONC MS 10MG DI	10.5MG	 
354239	LAMININ MOUSE NATURAL 1MG ULTRAPURE DI	1MG	 
 

相關(guān)配套產(chǎn)品 Transwell小室

貨號	描述/包裝
3421	（ 24孔，孔徑5.0um）濾膜直徑：6.5mm	2778.69
3422	（ 24孔，孔徑8.0um）濾膜直徑：6.5mm	980（特價）
3413	（ 24孔，孔徑0.4um）濾膜直徑：6.5mm	3087.69
3415	（ 24孔，孔徑3.0um）濾膜直徑：6.5mm	2778.69
3401	（ 12孔，孔徑0.4um）濾膜直徑：12mm	3225.46
3402	（ 12孔，孔徑3.0um）濾膜直徑：12mm	3205.73
3412	（ 6孔，孔徑0.4um）濾膜直徑：24mm	2448.70
3414	（ 6孔，孔徑3.0um）濾膜直徑：24mm	2448.70
3428	（ 6孔，孔徑8.0um）濾膜直徑：24mm	2448.70
3450	6孔，聚酯透明膜，0.4um濾膜直徑：24mm	1554.73
3460	12孔，聚酯透明膜，0.4um濾膜直徑：12mm	2961.50
3470	24孔，聚酯透明膜，0.4um濾膜直徑：6.5mm	3087.69
貨號	描述	報價
3419	Transwell皿（膜直徑75mm，孔徑0.4um）	￥3,100.00
3420	Transwell皿（膜直徑75mm，孔徑3.0um）	￥3,100.00
3452	Transwell板（6孔，聚酯透明膜，3.0um）	￥950.00
3462	Transwell板（12孔，聚酯透明膜，3.0um）	￥1,820.00
3472	Transwell板（24孔，聚酯透明膜，3.0um）	￥1,700.00
3491	膠原包被Transwell板嵌套（6孔板，0.4um）	￥2,560.00
3492	膠原包被Transwell板嵌套（6孔板，3.0um）	￥2,560.00
3493	膠原包被Transwell板嵌套（12孔板，0.4um）	￥2,560.00
3494	膠原包被Transwell板嵌套（12孔板，3.0um）	￥2,560.00
3495	膠原包被Transwell板嵌套（24孔板，0.4um）	￥2,560.00

貨號	描述	特價
PIHT12R48	Millicell Hanging Cell Culture 24 well PET 0.4um 48/pk	1268
PIRP12R48	Millicell Hanging Cell Culture 24 well PET 1um 48/pk	1268
PIEP12R48	Millicell Hanging Cell Culture 24 well PET 8um 48/pk	1168